二代测序实验室装修

测序实验室最怕的是污染，不是灰尘

二代测序做的是痕量核酸的扩增和读取，样本里的 DNA 含量可能只有皮克级，而一次 PCR 扩增出来的产物是海量的。这就带来一个特殊问题：上一步的产物飘到下一步的试剂里，就会出现假阳性，而且很难查出来源。所以测序实验室的装修逻辑，核心不是把粒子数做到多低，而是把人、物、气的流动方向锁死，让扩增产物回不去。

四个区怎么排

标准做法是四区分离：试剂准备区、样本制备区、文库构建区、测序区。顺序不能乱，气流和人员从试剂往测序方向走，绝不倒流。试剂准备区最干净，配超净工作台，只做试剂分装；样本制备区做核酸提取，配生物安全柜和核酸提取仪；文库构建区做片段化、末端修复、加接头、扩增；测序区放测序仪和数据分析设备。四个区各自独立，中间用传递窗传样，不设共用走廊。

压差怎么设

四个区之间要形成压力梯度，试剂准备区压力最高，往后逐级降低，测序区相对最低，这样气流永远从干净区流向可能有扩增产物的区域。相邻区之间压差不低于 5 帕，实测要能看出来。有的项目把所有区做成同一个压力，靠物理隔离防污染，效果差很多，因为门一开空气就串了。

洁净度和温湿度

样本制备和文库构建建议做到万级，试剂准备区做局部百级的超净台就够，测序区十万级即可。温度控制在 20 到 25 摄氏度，湿度 40% 到 60%。湿度这个参数容易被忽略：太干静电多，移液器和枪头容易吸附气溶胶；太湿试剂容易吸潮，酶活性受影响。南方梅雨季要配除湿，北方冬季要配加湿。

测序仪的安装条件

测序仪对振动和供电比较敏感。位置要避开电梯井、空压机、离心机这些振源，必要时做独立基础或者减振垫。供电要独立回路，配 UPS，断电一次可能损失一整批数据。散热也要算，一台测序仪的散热量相当于好几台服务器，空调冷量要留足，机身后方留 800 毫米以上的检修和散热空间。

数据和网络

测序一个 run 的数据量在几百 GB 到几 TB，网络和存储要提前规划。建议机房单独隔一间，配精密空调、机柜、UPS 和独立的网络出口。如果做临床检测，还要考虑数据安全和追溯要求，服务器本地化部署，不做公有云。网线用六类或者光纤，千兆起步，有条件上万兆。

几个容易漏的点

一是紫外灯，每个区都要配，用于无人时消毒，开关装在门外，防止误开伤人。二是冷链，样本和试剂的冰箱、冰柜位置要预留散热和电量，零下 80 度冰箱单独回路。三是废弃物，扩增产物和废弃试剂属于污染源，要有专门的灭活和收集流程，装修时预留高压灭菌锅位置。四是门禁，四个区最好做权限管理，非授权人员进不去。

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